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UA-Glo One-luc Luciferase Assay System

UA-Glo One-luc Luciferase Assay System

货号: UA079010
价格: 270
规格: 10ml
产品规格
  • 分子别名

    One-luc 荧光素酶检测试剂盒
  • 储存条件

    One-luc 荧光酶检测试剂盒储存于 20℃ 及以下性能稳定至少 1 年。开瓶后不能一次用完的试剂,建议分装后-20℃冻存。建议冻融不超过 3 次,每次在室温放置时间不超过 2 小时。短期连续使用的情况下,试剂可存放在 4℃ 冰箱不超过 5 天。

  • 稀释度

背景介绍
  • 荧光素酶报告基因系统(Luciferase-based reporter gene system)被广泛应用于细胞内信号通路、转录因子调节、受体功能研究、高通量药物筛选等。胞内荧光素酶的表达能够定量进行检测,其工作原理是荧光素酶在底物荧光素(Luciferin)、ATP和分子氧的存在下,能将荧光素氧化成氧化荧光素(Oxyluciferin),从而产生自发的冷光,在过量的荧光素和ATP存在时,发光的强度与荧光素酶的量成正相关。

    UA-Glo均质即用稳定型荧光素酶检测试剂盒用于定量检测细胞中表达的荧光素酶(Luciferase) 含量。该试剂具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点。即用型的配方减少了先裂解后检测的实验步骤,从而进一步减少了因为频繁加样导致的误差。稳定型荧光素酶检测试剂盒检测信号半衰期一般可达 2 小时,尤其适合高通量的样品检测。
    One-luc 荧光素酶检测试剂盒化学稳定性更好,检测试剂在 4 ℃保存 5 天,其检测反应信号减弱只有15%左右,方便需要短时间内反复使用试剂盒的客户,与国外 ONE-Glo 产品性能相近。

产品组分
  • ATP,荧光素,缓冲液混合后灌装于 10 ml 或 100 ml 的棕色瓶中,规格如下:

    规格

    可检测的 96-孔板孔数

    可检测的 384-孔板孔数

    10 ml

    100 wells

    500 wells

    100 ml

    1,000 wells

    5,000 wells

    10X100 ml

    10,000 wells

    50,000 wells


操作步骤
  • 1. 实验前将One-luc荧光素酶检测试剂平衡至室温,轻摇混匀。

    2. 将待测细胞板(白色透底或黑色透底板)在室温平衡10分钟。

    3. 加入与细胞培养液等体积的检测试剂到各培养反应孔。

    4. 在振板机上振荡1分钟,将样品板在室温避光孵育5~8分钟。

    5. 在luminescence读板仪上读取并记录荧光信号。

  • 生物活性JSON

    • One-luc 荧光素酶检测试剂盒信号稳定性测试: HEK293 细胞接种于 96 孔细胞培养板中;5 小时后转染荧光素酶表达质粒;转染
      48 小 时后,取出细胞在室温平衡 10 分钟,然后加入平衡至室温的One-luc 荧光素酶检测试剂,混匀,在不同时间点连续读取荧光
      值。比对试剂为国外品牌同类产品。图中数值代表两个重复的平均值。

    • HEK293 细胞接种于 6 孔细胞培养板中,转染荧光素酶表达质粒;转染 48 小 时后,酶消化细胞,计数,再分入 96 孔反应板中,每孔的细胞数如表中所示,然后加入平衡至室温的 One-luc 检测试剂检测,未转染的细胞为对照,在不同时间点连续读取荧光值,计算读数比。比
      对试剂是国外知名品牌同类产品。表中数值是两个重复的平均值。