-20℃及以下避光储存，有效期 12 个月。
即用型 Caspases 3/7 细胞凋亡检测试剂盒用于定量检测细胞中 Caspases 3 和 7的活性。将该试剂加入待测细胞后，细胞裂解释出的 Caspases 3/7 切割试剂中的 Caspases 3/7 特异性的多肽荧光素偶联底物从而释出荧光素，试剂中的荧光素酶可以催化荧光素反应而产生光，光的强度和 Caspases 3/7 的活性成正比关系。该试剂具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点。均质即用型的配方减少了实验准备和操作步骤，降低了因为多次加样导致的误差，且其稳定的辉光信号使该产品尤其适合高通量的化合物筛选。
荧光素酶，多肽荧光素偶联底物，缓冲液混合后灌装于 10 ml 或 100 ml 的棕色瓶中，规格如下：
规格 | 可检测的 96-孔板孔数 | 可检测的 384-孔板孔数 |
2.5 ml | 50 wells | 250 wells |
10 ml | 200 wells | 1000 wells |
100 ml | 2,000 wells | 10,000 wells |
10X10 ml | 2,000 wells | 10,000 wells |
1. 细胞准备
1) 在 96 孔或 384 孔白色细胞培养板铺合适密度的细胞。
2) 根据实验设定，细胞孵育一定时间后将合适浓度的待检测化合物加到细胞板孔中。建议设置只加溶剂载体的细胞对照（阴性对照）和只加溶剂载体的细胞培养基对照（空白对照）（说明详见注意事项 4）。
3) 根据实验需求继续培养合适的时间诱导细胞凋亡。
2. Caspases 3/7 细胞凋亡检测
1) 取出Caspases 3/7 细胞凋亡检测试剂，在室温平衡 20 分钟。轻摇混匀。
2) 取出待测细胞培养板，在室温平衡 20 分钟。
3) 加 50 µl 的检测试剂到 100 µl 96 孔板细胞中, 或 10 µl 试剂到 20 µl 384 孔板细胞中，振板 2 分钟，放置暗处室温孵育 30-60min 。荧光信号一般在加入检测试剂 1hr 左右达到最大值。最早可以在加入检测试剂后 30min 读板, 最晚不要超过 3hr。
4) 在荧光读板机上读取荧光信号。
1. 按照说明书分装储存反应试剂，保证试剂的稳定性。
2. 非经严格验证，不建议随意改变反应试剂用量。
3. 荧光素酶反应对温度变化敏感。试剂和测试样品需要平衡到室温（22℃-26℃），测试过程温度保持恒定（±1℃）。
4. 空白对照是对细胞培养系统和Caspase 3/7 检测试剂相关的背景荧光的测量，可以选择从检测值中减去空白对照后再进行相应的计算。细胞阴性对照反映了待测细胞的基础Caspase 3/7 活性，可作为实验结果解释的参考。
5. 本产品仅作科研用途。
Caspases3/7细胞凋亡检测试剂检测化合物Staurosporine(STSP)对HeLa细胞凋亡的作用：4x105/ml 的HeLa细胞接种于96孔白板透明底培养板，100µl/孔。24小时后加入3倍稀释的STSP，37℃5%CO2孵育6hr后按照Caspases3/7细胞凋亡检测试剂的说明进行Caspases3/7活性检测。图1示加入检测试剂后30min-130min读取荧光值的剂量曲线，表格为计算所得的EC50值。
Caspases3/7细胞凋亡检测灵敏度测试：1μMSTSP处理HeLa细胞6hr后，两倍系列稀释的STSP处理的HeLa细胞接种于96孔透明底白板，100µl/孔；细胞浓度为25，000-180cell/well。按照Caspases3/7 细胞凋亡检测试剂的说明进行Caspases3/7活性检测。左图示在检测的40min-70min，荧光信号和细胞凋亡数成线性相关（R2>0.99），可以检测低至200个凋亡细胞。右图示1μMSTSP和溶剂DMSO处理HeLa细胞6hr后进行Caspases3/7活性检测(70min荧光检测数值)。
您现在的位置：
