-20℃及以下避光储存,有效期 12 个月。
3D 细胞活力检测试剂盒用于定量检测 3D 模型细胞中 ATP 的含量,而 ATP的含量和活细胞的数量呈正比关系。该试剂具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点。即用型的配方减少了先裂解后检测的实验步骤,从而进一步减少了因为频繁加样导致的误差,且其稳定的辉光信号使该产品尤其适合高通量的 3D 模型细胞增殖检测和化合物筛选。
荧光素酶,荧光素,缓冲液混合后灌装于 10 ml 或 100 ml 的棕色瓶中,规格如下:
规格 | 可检测的 96-孔板孔数 | 可检测的 384-孔板孔数 |
10 ml | 200 wells | 200 wells |
100 ml | 2,000 wells | 2,000 wells |
10X10 ml | 2,000 wells | 2,000 wells |
1. 细胞准备
1) 3D 细胞模型构建:根据实验需求进行相关 3D 细胞模型构建,例如 3D 细胞球模型。
2) 如果实验为测定化合物对 3D 细胞模型的作用,将合适浓度的待检测化合物加到细胞板孔中。培养液中有机溶剂浓度保持在 2%以下。根据实验需求继续培养合适的时间。
2. 细胞活力检测
1) 取出 3D 细胞活力检测试剂【注1】,平衡至室温(22℃-25℃)【注2】,轻摇混匀。
2)取出待测细胞培养板,平衡至室温(22℃-25℃)。3D 细胞活力检测需要在白色实验板进行检测,如果待测细胞培养板为透明或黑色实验板,需要将 3D 模型转入白色实验板后进行检测。
3)加 50µL 的 3D 细胞活力检测试剂到 100µL 的 96 孔板 3D 模型细胞中, 或 10µL 试剂到 20µL 的384 孔板 3D 模型细胞中【注3】。
4)剧烈振荡实验板 5 分钟以充分裂解细胞【注4】,放置暗处平衡反应 25 分钟。
5)在荧光读板仪上读取荧光信号【注5】。
1) 首次使用试剂后应分装并于-20℃及以下避光储存,保证试剂的稳定性。3D 细胞活力检测试剂反复冻融 5 次信号强度降低<10% 并且功能无损失,放置于室温(22℃)8hr 或 4℃ 72hr 信号强度降低<10% 并且功能无损失。
2) 3D 细胞活力检测试剂中的荧光素酶反应对温度变化敏感。试剂和实验板需要平衡到室温(22℃-25℃),测试过程温度保持恒定(±1℃)
3) 非经严格验证,不建议随意改变反应试剂用量。细胞培养基和检测试剂的体积比应为 2:1。
4) 剧烈振荡实验板以充分裂解细胞是非常必要的,同时要注意实验孔中的液体无溢出。
5) 3D 细胞活力检测试剂对不同的细胞类型的 3D 模型信号衰减速度不同,信号半衰期在 1.5h-3h间,建议读板时间不超过 1h-2h。
6) 本产品仅作科研用途。